pUCD_recA重組發(fā)光菌構(gòu)建及對遺傳毒性污染物響應(yīng)作用
| 論文類型 | 基礎(chǔ)研究 | 發(fā)表日期 | 2009-06-01 |
| 來源 | 環(huán)境科學(xué) | ||
| 作者 | 黃新新,何苗,,羅虹,,施漢昌,,蔡強 | ||
| 關(guān)鍵詞 | 重組發(fā)光菌;遺傳毒性;pUCD2recA 載體;響應(yīng)效應(yīng) | ||
| 摘要 | 基因重組發(fā)光菌在水質(zhì)毒性的評價中具有重要的作用,本研究從分析污染物毒性損傷的機制出發(fā),構(gòu)建新型pUCD2 recA基因重組發(fā)光菌. 用PCR 法從大腸桿菌W3110 中擴增recA 基因,將其與pGEM2T easy 載體連接后測序. 測序正確的recA 片段及pUCD615 載體均用BamH Ⅰ、EcoR Ⅰ雙酶切,連接后電轉(zhuǎn)化導(dǎo)入宿主菌JM109. 挑取克隆,提取質(zhì)粒用PCR 鑒定,陽性克隆再進(jìn)行測序. 將構(gòu)建成功的pUCD2recA 載體轉(zhuǎn)化入大腸桿菌RFM443 ,加入相應(yīng)的遺傳毒性污染物,觀察發(fā) | ||
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