吸附、降解組合生物系統(tǒng)處理含銅離子城市污水
論文類型 | 技術(shù)與工程 | 發(fā)表日期 | 2006-02-01 |
來(lái)源 | 中國(guó)水網(wǎng) | ||
作者 | 吳曉林,王磊,高燕,蘇耀東,李風(fēng)亭 | ||
關(guān)鍵詞 | 細(xì)胞生長(zhǎng)相 細(xì)胞預(yù)處理 COD去除 COD吸附能力 Cu2+吸附 Pseudomonas putida | ||
摘要 | 采用Pseudomo ns putida 5-X細(xì)胞為吸附劑的生物吸附過(guò)程組合SBR生物降解系統(tǒng)處理含銅離子城市廢水.研究了生物吸附劑Pseudomo ns putida 5-x細(xì)胞的最佳制備條件以及組合系統(tǒng)的運(yùn)行過(guò)程.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在優(yōu)化的條件下,Pseu.domo ns putida 5-x細(xì)胞對(duì)銅離子的吸附容量可達(dá)87.3mg·g-1,經(jīng)生物吸附處理后,污水中cu 的含量顯著降低,盡管殘留的Cu2+對(duì)活性污泥吸附COD的能力尚有一定影響,但已不影響SBR系統(tǒng)對(duì)廢水中COD的去除效果.研究表明,在活性 |
Combined Bio.Process for Treatment of M unicipal W astewater Containing CU ’
WU Xiao-lin,W ANG Lei,GAO Yan,SU Yao—dong,LI Feng—ting
(1.Department of Chemistry,Tongji University,Shanghai 200092,China;2.State Key Lab of Pollution Control& Resource Reuse,Tongji University,Shanghai 200092,China;3.Wuhan Designing Institute of China Light Industry,Wuhan 430063,China)
Abstract:A combined bioprocess consisting of biosorption section with P.putida 5一x cell as biosorbent followed by a SBR is deve1. oped tO treat Cu2+ containing municipal wastewater.The optimal preparing technique of P.putida 5-X cell as biosorbent is studied. Under the optimal condition.a(chǎn)dsorption capacity of the P.putida 5-X cell tO Cu reached 87.3 mg·g-1.The performance of the combined bioprocess for treating Cu2+ containing wastewater is asses,sad.The experimental results indicate that after trea tment by the biosorption section,the Cu2+ concentration in wastewater reduced to the level that did not inhibit COD removal efficiency of subsequent SBR activated sludge process.a(chǎn)lthough it still affectes the COD adsorption capacity of activated sludge.In terms of COD removal,the biosorption section is efficient for reducing Cu2+ concentration to provide biodegradable wastewater for subsequent SBR activated sludge proc ess.
Key words:cell growth phase;cell pretreatment;removal of COD;COD adsorbing capability;Cu2+ adsorbing;Pseudomonas putida
Cu2+是工業(yè)廢水中最常見(jiàn)的重金屬離子之一,研究表明,當(dāng)污水中Cu2+濃度達(dá)到1.0mg·L-1以上時(shí),活性污泥系統(tǒng)中微生物的生長(zhǎng)就開(kāi)始受到影響,達(dá)到10mg·L-1以上時(shí),微生物生長(zhǎng)受到明顯抑制[1,2].因此,在進(jìn)入活性污泥過(guò)程前,應(yīng)將Cu2+濃度降到1.0mg·L-1或更低[3].
廢水中重金屬離子的傳統(tǒng)處理方法有化學(xué)沉淀、離子交換、電化學(xué)法等.這些處理方法都有明顯缺點(diǎn),尤其當(dāng)重金屬離子濃度較低時(shí)(100mg·L-1以下),如去除不完全、處理劑消耗量大、產(chǎn)生環(huán)境有害污泥及成本高等,且加入的化學(xué)試劑將嚴(yán)重影響后續(xù)活性污泥的活性[4].近20年來(lái),利用某些具有高吸附能力的微生物細(xì)胞從廢水中吸附重金屬離子的方法引起了人們的廣泛關(guān)注,據(jù)報(bào)道,一些細(xì)菌、酵母菌、真菌和藻類等都可作為廢水中的Cu2+,Ni2+,Pb2+ ,Zn2+ 等金屬離子的吸附劑[5-8].在以前的研究中,篩選1株革蘭氏陰性細(xì)菌Pseudomonas putida 5-x,研究表明該細(xì)菌對(duì)Cu2+和Ni2+有較高吸附能力[9,10],可以作為生物吸附劑用于從廢水中吸附回收重金屬離子.
本文介紹了進(jìn)一步提高P.putida 5-x細(xì)胞吸附能力的細(xì)胞制備技術(shù),并研究了其在生物吸附一生物降解組合系統(tǒng)處理含Cu2+廢水時(shí),對(duì)Cu2+的去除能力,以及殘余的Cu2+對(duì)隨后的SBR系統(tǒng)降解有機(jī)污染物的影響,并和單一的SBR處理含Cu2+廢水作了比較.
1 材料和方法
1.1 Pseudomonas putida 5-x細(xì)胞吸附劑的制備和再生
本實(shí)驗(yàn)所用的生物吸附劑為電鍍廠廢水中分離出的革蘭氏陰性細(xì)菌Pseudomonas putida 5-x(圖1),該細(xì)菌具有較高的重金屬離子吸附能力.將其接種到50mL LB培養(yǎng)基中,30℃ ,200r/min搖床培養(yǎng)24h.隨后以1%的接種量接種于5種不同的培養(yǎng)基中(表1).于30℃ ,200r/min搖床培養(yǎng)12~48h.將培養(yǎng)液在4℃ ,4 000 r/min離心分離10min得到菌體,用100 mL pH為6.0的10mol·L-1MES緩沖液洗2次.預(yù)處理方法為每100mg P.putida 5-x細(xì)胞用25mL不同的洗滌液于25℃ ,200r/min振蕩洗滌30min,再用50mL pH為6.0的10mol·L-1MES緩沖液洗滌.再生方法同預(yù)處理方法.
表1 5種培養(yǎng)基的配方
Table 1 Composition of five culture mediums
0.1
0.1 0.1 1.2 透視電鏡(TEM)分析
處理后的細(xì)胞經(jīng)離心,乙醇脫水后,固定在Spurr介質(zhì)上,切成厚度為60nm 的薄片,進(jìn)行透射電鏡分析.使用電鏡為JEM一1200EX—II(JEOL,日本).
1.3 吸附.降解組合生物系統(tǒng)及其操作
實(shí)驗(yàn)室所用的組合生物系統(tǒng)包括1個(gè)半連續(xù)生物吸附裝置和1個(gè)序批式反應(yīng)器(SBR).生物吸附裝置由2個(gè)吸附槽、1個(gè)再生槽和1個(gè)洗滌槽組成.每個(gè)吸附槽容積為1L,內(nèi)有磁子進(jìn)行磁力攪拌.廢水與生物吸附劑以對(duì)向的方式進(jìn)入,即600mL含銅離子城市污水首先進(jìn)入第1個(gè)吸附槽中,經(jīng)20min攪拌吸附后靜置10min,上清液進(jìn)入第2個(gè)吸附槽進(jìn)行二次吸附一沉淀操作,二次吸附后的上清液進(jìn)入SBR反應(yīng)器進(jìn)行活性污泥法處理以去除COD.生物吸附劑首先進(jìn)入第2個(gè)吸附槽中,經(jīng)過(guò)一次吸附一沉
淀操作后再進(jìn)入第1個(gè)吸附槽用于吸附,飽和后轉(zhuǎn)入再生槽進(jìn)行再生,再生后的吸附劑再進(jìn)入第2個(gè)吸附槽,以此類推(見(jiàn)圖2).SBR的容量為3L,設(shè)計(jì)MLVSS為2000~3000mg·L-1 ,運(yùn)行周期為8h,包括4步:進(jìn)水(10min,2L);反應(yīng)(6.5 h);靜置(1.0h);排出(20min,2L).
實(shí)驗(yàn)所配含各種Cu 濃度的城市污水的COD為800mg·L-1左右.
1.4 Cu 吸附等溫線
取一定體積含Cu2+城市污水, Cu2+濃度分別為10mg·L-1 ,25mg·L-1 ,30mg·L-1,50mg·L-1,加入0.5g·L-1 生物吸附劑.測(cè)定吸附后污水中殘留的Cu2+濃度,計(jì)算生物吸附劑對(duì)Cu2+的吸附容量,并繪制Cu2+的吸附等溫線.
1.5 分析方法
細(xì)胞干重的測(cè)定:取100mL 培養(yǎng)液,經(jīng)4 000r/min離心20min得到菌體,用蒸餾水洗滌2次,于80℃ 烘干至恒重,用電子天平稱重.
培養(yǎng)液中的細(xì)胞生長(zhǎng)情況通過(guò)測(cè)定培養(yǎng)液的OD600值確定.用Perkin Elmer 3300原子吸收儀測(cè)定Cu2+的濃度.根據(jù)APHA標(biāo)準(zhǔn)法測(cè)定COD和MLVSS[11].Cu2+的吸附容量根據(jù)下式計(jì)算:
Q-(Ci—Ce)V/W
Q 為Cu2+的吸附能力(mg·g-1);Ci為污水中Cu2+的初始濃度(mg·L-1);Ce為吸附后上清液中Cu2+的濃度(mg·L-1);W 為細(xì)胞干重(g);V為緩沖液體積(L).
2 結(jié)果和討論
2.1 培養(yǎng)基成分對(duì)P.putida 5一X細(xì)胞吸附能力的影響
本研究中,使用了5種培養(yǎng)基培養(yǎng)P.putida 5一X細(xì)胞,并測(cè)定不同培養(yǎng)基培養(yǎng)的P.putida 5一X細(xì)胞吸附銅離子的能力.表2可見(jiàn),硫和氮限制的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的P.putida 5-X細(xì)胞對(duì)Cu2+的吸附能力顯著提高.但培養(yǎng)基中氮含量低時(shí)P.putida 5一X生長(zhǎng)速度較慢,故使用硫限制培養(yǎng)基培養(yǎng)P.putida 5-x細(xì)胞是最佳選擇.以后的研究中細(xì)胞培養(yǎng)均采用硫限制培養(yǎng)基.
完全培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞中C,N,P,S的比例有一個(gè)相對(duì)固定值,一般細(xì)胞的C:N:P:S約為50:14:3:1[11].當(dāng)培養(yǎng)基中硫和氮含量低時(shí),細(xì)胞缺少S源或N源,正常合成和代謝功能受到限制,而細(xì)胞吸收的過(guò)量C源、P源不能加入正常的細(xì)胞生長(zhǎng)代謝,只能合成為生長(zhǎng)和代謝非必需的含碳和含磷的多糖和聚磷酸類化合物并儲(chǔ)存在細(xì)胞內(nèi)[12].多糖中的羰基和多磷酸鹽中的膦酸脂都帶有負(fù)電荷,是細(xì)胞表面吸附重金屬的功能基團(tuán).所以在N和S限制培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的細(xì)胞表面組分中多糖和聚磷酸鹽含
量較高,因此細(xì)胞吸附重金屬的能力也顯著提高.
2.2 細(xì)胞生長(zhǎng)周期對(duì)吸附能力的影響
在硫限制培養(yǎng)基中,P.putida 5-X的生長(zhǎng)可分為4個(gè)階段:停滯期(0~8h),對(duì)數(shù)增長(zhǎng)期(10~24h),穩(wěn)定期(26~36h)和衰亡期(38~44h)。32~34h時(shí),細(xì)胞數(shù)量達(dá)到最大值;同時(shí),在50 mg·L-1Cu2+溶液中測(cè)定不同生長(zhǎng)期P.putida 5一X細(xì)胞的吸附重金屬離子的能力,見(jiàn)圖3.當(dāng)細(xì)胞進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期時(shí),對(duì)Cu2+的吸附能力逐漸降低,在24~26h時(shí)達(dá)到最低值24.8mg·L-1。.當(dāng)細(xì)胞進(jìn)入穩(wěn)定生長(zhǎng)期,對(duì)Cu2+的吸附能力逐漸升高,并在穩(wěn)定生長(zhǎng)期的后期加速上升.在穩(wěn)定期的末期,P.putida 5一X對(duì)Cu2+的吸附能力達(dá)到最大值67.7mg·L-1。,在衰亡期細(xì)胞吸附能力再次降低.
表2 不同的營(yíng)養(yǎng)限制對(duì)P.putida 5.x細(xì)胞生長(zhǎng)和Cu2+吸附容量的影響
Table 2 Effect of nutrition limitation on cell growth and adsorption capability of P.putida 5一x
細(xì)胞吸附重金屬的能力與細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)和組成有關(guān)[13,14].細(xì)胞表面組分中的脂多糖、蛋白質(zhì)、肽聚糖和膦酸脂等都含有帶負(fù)電荷的基團(tuán),如羰基、磷酸基和羥基等,都有利于吸附重金屬[15].不同生長(zhǎng)期的細(xì)胞表面組成不同,帶有負(fù)電荷的基團(tuán)的數(shù)量不同,因而吸附能力不同.在衰亡期,由于細(xì)胞自溶引起表面結(jié)構(gòu)破壞,故吸附能力顯著下降.
考慮到細(xì)胞產(chǎn)量和吸附能力,最佳收獲期在培養(yǎng)36h左右.故本實(shí)驗(yàn)所用細(xì)胞均取自培養(yǎng)36h的培養(yǎng)液.
2.3 細(xì)胞預(yù)處理對(duì)Cu2+吸附的影響
使用不同的洗液對(duì)P.putida 5-x細(xì)胞進(jìn)行預(yù)處理,與未進(jìn)行預(yù)處理的細(xì)胞對(duì)比,發(fā)現(xiàn)經(jīng)稀酸或(NH4)2SO4 洗滌后,細(xì)胞吸附Cu2+的能力提高11%~26%,而使用堿液或濃酸液洗滌,細(xì)胞吸附Cu2+的能力降低,見(jiàn)表3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明0.1~0.3 mo1·L-1 HC1是最佳細(xì)胞預(yù)處理劑.
表3 預(yù)處理對(duì)細(xì)胞銅離子吸附容量的影響
Table 3 Effect of pretreatment on cell Cu adsorption capability
吸附實(shí)驗(yàn)顯示,新鮮細(xì)胞和0.3mol·L-1 HC1預(yù)處理的細(xì)胞對(duì)Cu2+的吸附過(guò)程可以分別用公式Qp= 26.9Ce0.75和Qf=12.8Ce0.68 表示,見(jiàn)圖4,這表明新鮮細(xì)胞和預(yù)處理細(xì)胞對(duì)Cu2+的吸附符合Freundlich吸附等溫線方程Q=Kf·Cen,因此這一吸附過(guò)程是一個(gè)物理吸附過(guò)程.公式中Kf值代表了吸附劑的吸附能力[18],預(yù)處理細(xì)胞的Kf值為26.9,遠(yuǎn)大于新鮮細(xì)胞的Kf值12.8,也表明預(yù)處理細(xì)胞對(duì)Cu2+來(lái)說(shuō)是一種比新鮮的P.putida 5-x細(xì)胞更好的吸附劑.
通過(guò)透射電鏡(TEM)觀察,發(fā)現(xiàn)未經(jīng)預(yù)處理的細(xì)胞表面有一結(jié)構(gòu)松散層(圖5a),經(jīng)0.3mol·L-1HC1處理后,該松散層被降解(圖5b).細(xì)菌表面莢膜的含水率高達(dá)95%,由單層或多層糖和蛋白質(zhì)組成.由于含水量高,莢膜中的這些聚合物很容易變形并向外伸展出幾百nm,完全處于水中,很容易被洗滌液洗脫[16].用0.3mol·L-1HC1進(jìn)行預(yù)處理以去除細(xì)菌表面的莢膜結(jié)構(gòu),可以使細(xì)胞外膜和肽聚糖層上的大量負(fù)電荷基團(tuán)充分和Cu2+結(jié)合,從而提高對(duì)Cu2+離子的吸附能力.透射電鏡分析表明,P.putida 5-x細(xì)胞經(jīng)酸預(yù)處理后細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)松散的莢膜被降解,從而提高了P.putida 5-x吸附Cu2+的能力.用堿液或濃酸處理會(huì)徹底破壞細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)和成分從而使吸附能力降低.
理論上,莢膜中的糖和蛋白質(zhì)都含有帶負(fù)電荷的羰基和羥基,有利于與重金屬結(jié)合成鍵,但由于電荷密度低,成鍵作用有限.Cu2+為二價(jià)離子,需2個(gè)帶負(fù)電荷的吸附基團(tuán)與之成鍵,由于細(xì)菌莢膜的含水量高導(dǎo)致其易變型,成鍵易引起莢膜表面構(gòu)造發(fā)生變化[17],造成在細(xì)胞外膜和肽聚糖層上的一些可以結(jié)合Cu2+的位點(diǎn)(電荷密度遠(yuǎn)高于莢膜中)無(wú)法結(jié)合Cu2+離子(圖6).因此,用0.3mol·L-1HC1進(jìn)行預(yù)處理以去除細(xì)菌表面的莢膜結(jié)構(gòu),可以使細(xì)胞外膜和肽聚糖層上的大量負(fù)電荷基團(tuán)充分和Cu2+結(jié)合,從而提高對(duì)Cu2+離子的吸附能力.當(dāng)用堿液或濃酸處理會(huì)徹底破壞細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)和成分,使吸附能力降低.
2.4 組合生物處理系統(tǒng)對(duì)廢水中Cu 的去除
組合生物處理系統(tǒng)中的半連續(xù)生物吸附裝置用于去除廢水中的Cu2+.收集在硫限制培養(yǎng)基中培養(yǎng)36h的P.putida 5-x細(xì)胞(干重為0.2g),使用0.3mol·L-1HC1預(yù)處理后的菌體作為生物吸附劑,經(jīng)5次吸附一再生一吸附循環(huán)使用.含不同濃度Cu2+的城市污水經(jīng)生物吸附裝置處理后的結(jié)果,見(jiàn)表4。5次吸附循環(huán)中該生物吸附劑對(duì)不同濃度Cu2+的吸附率都在95%左右,處理后廢水中的Cu2+濃度降低到0.46~1.27mg·L-1,表明經(jīng)過(guò)優(yōu)化條件制備的P.putida 5-x細(xì)胞對(duì)Cu 的吸附能力增強(qiáng),再生4次后的吸附效果基本保持不變.細(xì)胞的再生回用可以減少吸附劑用量從而減少污泥量和運(yùn)輸費(fèi)用,降低了生物吸附的成本.因此該生物吸附劑是一種適合于實(shí)際應(yīng)用的優(yōu)良的Cu 吸附劑。
表4 組合生物處理系統(tǒng)中的生物吸附部分的運(yùn)行結(jié)果
Table 4 Results of bio-adsorption of combined bio-proc es
1)所有數(shù)據(jù)均為5次吸附一再生循環(huán)過(guò)程中的平均值
2.5 Cu2+濃度對(duì)活性污泥過(guò)程去除COD的影響
活性污泥處理過(guò)程中,有機(jī)物必須先吸附在活性污泥上,才能被微生物降解,因此活性污泥對(duì)COD 吸附能力下降,必將影響其對(duì)COD的降解效率.COD吸附容量(CAC)可以用來(lái)評(píng)價(jià)活性污泥吸附有機(jī)物的能力,CAC可定義為活性污泥和有機(jī)廢水接觸前5 min內(nèi)廢水中C0D的減少(因?yàn)樯锝到膺^(guò)程是一個(gè)較緩慢的過(guò)程,前5
min的COD下降主要是活性污泥對(duì)廢水中的COD吸附效應(yīng)所致).污水中重金屬離子的濃度較低時(shí),一般不會(huì)對(duì)微生物細(xì)胞中的降解酶產(chǎn)生抑制,但由于重金屬離子強(qiáng)烈的吸附競(jìng)爭(zhēng)作用,活性污泥對(duì)有機(jī)物的吸附速率和能力仍將受到影響[18]。
圖7表示的是污水中不同濃度的Cu2+對(duì)活性污泥CAC值和COD去除能力的影響.隨著污水中Cu2+濃度升高時(shí),活性污泥的CAC值顯著降低.經(jīng)生物吸附后,原水中Cu2+濃度由10 mg·L-1,20mg·L-1,30mg·L-1分別降低到0.46mg·L-1,1.02mg·L-1,1.27mg·L-1.相應(yīng)地,活性污泥的CAC值(COD)由44.2mg·g-1,35.7mg·g-1,24.6mg·g-1,44.2mg·g-1升高為89.5mg·g-1,81.8mg·g-1,78.9mg·g-1(圖7).盡管生物吸附后活性污泥的CAC值比未吸附時(shí)升高,但是與不含Cu2+的相比,還是低了8% ~18%.當(dāng)污水中Cu2+濃度為10mg·L-1,20mg·L-1,30mg·L-1時(shí),COD去除率分別為74.4%,66.8%,57.9%.但生物吸附處理后,污水中Cu2+的濃度大大降低,SBR的COD去除率提到92%左右,和處理不含Cu2+時(shí)的去除率基本一致.這些結(jié)果表明,生物吸附后污水中的微量Cu2+依然對(duì)活性污泥的CAC存在影響,但對(duì)COD
去除率不再有顯著抑止作用.進(jìn)一步說(shuō)明,微量的Cu2+對(duì)微生物細(xì)胞的代謝酶無(wú)毒害作用,但對(duì)有機(jī)物在活性污泥菌膠團(tuán)表面的吸附競(jìng)爭(zhēng)仍然存在.這種競(jìng)爭(zhēng)雖然對(duì)活性污泥吸附有機(jī)物不利,但對(duì)SBR工藝去除COD已基本沒(méi)有影響,尤其當(dāng)水力停留時(shí)間(HRT)較長(zhǎng)時(shí)(HRT>>5min)影響甚微[18].實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明,使用P.putida 5-x細(xì)胞作為生物吸附劑去除污水中的Cu2+以提高污水的可生化性是相當(dāng)有效的.
將該組合生物處理系統(tǒng)與單獨(dú)的SBR工藝對(duì)比,各自處理含Cu2+的有機(jī)廢水的結(jié)果見(jiàn)表5.結(jié)果顯示,組合生物處理系統(tǒng)處理后出水中的Cu2+和C0D濃度遠(yuǎn)低于單一SBR法.說(shuō)明使用生物吸附一生物降解組合處理系統(tǒng)可以有效處理含重金屬離子的城市污水.
表5 組合生物處理系統(tǒng)與單一SBR的比較/mg·L-1
Table5 Comparition of combined bio-process and SBR/mg·L-1
3 結(jié)論
采用生物吸附一SBR組合的處理工藝可有效處理含Cu2+的城市污水.P.putida 5一x菌體經(jīng)硫限制培養(yǎng)基培養(yǎng),并在培養(yǎng)36h后收集,經(jīng)0.1~0.3mol·L-1 HC1洗滌后作為生物吸附劑,可得到最佳吸附效果.透射電鏡分析指出,酸洗預(yù)處理由于去除了細(xì)胞莢膜,提高了細(xì)胞對(duì)Cu2+的吸附能力.新鮮細(xì)胞和酸預(yù)處理細(xì)胞對(duì)Cu2+的吸附過(guò)程是物理吸附過(guò)程,遵從Freundlich吸附等溫線.經(jīng)P.putida 5一x細(xì)胞的生物吸附處理后,污水中Cu2+濃度降到微量級(jí),對(duì)SBR去除COD已無(wú)明顯影響,但對(duì)菌膠團(tuán)吸附有機(jī)物尚存在較明顯的吸附競(jìng)爭(zhēng).與單獨(dú)SBR相比,組合生物處理系統(tǒng)更適合處理含重金屬離子的城市污水.
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