吳烈，潘志平
(北京有色冶金設(shè)計(jì)研究總院，北京100038)

　　摘　要：闡述了用生物化學(xué)方法處理酸性及含重金屬離子廢水的機(jī)理、應(yīng)用、工藝實(shí)用化的條件和研究進(jìn)展。?
　　關(guān)鍵詞：礦山廢水；重金屬離子；氧化亞鐵硫桿菌；硫酸還原菌?
　　中圖分類號(hào)：X703.1
　　文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B
　　文章編號(hào)：1000-4602(2001)10-0031-04

　　煤礦、金屬硫化物礦山、鐵礦山是金屬污染水環(huán)境的主要來源。重金屬離子廢水一般采用物 化法進(jìn)行處理，如自然凈化、化學(xué)沉淀、離子交換吸附、蒸發(fā)和電解等。生物化學(xué)法作為一種低能量消耗的處理方法，一般用于處理有機(jī)物含量較高的污水，對(duì)于重金屬離子等無機(jī)物的去除，20世紀(jì)80年代以來國(guó)內(nèi)外正積極地開展研究和合作。?

1　重金屬與微生物

1.1　重金屬的抑制作用
　　重金屬超過某一濃度時(shí)，就會(huì)顯示出對(duì)生物的毒害作用，表1列出活性污泥處理設(shè)施中重金 屬允許濃度。?

表1　活性污泥處理中重金屬允許濃度　　mg/L 銅 鋅 汞 六價(jià)鉻 三價(jià)鉻 鐵 鉛 鎘 砷 1 5 0.01 0.5 3 10 0.5 0.1 0.2

　　 當(dāng)曝氣池進(jìn)水中含銅為5mg/L時(shí),對(duì)于去除BOD₅的阻礙率為15%；含鋅為10mg/L時(shí) ,BOD₅去除率明顯降低;汞濃度為0.5mg/L時(shí),不利于活性污泥的凝聚,含量為0.25mg/ L時(shí),對(duì)BOD₅的檢測(cè)過程呈現(xiàn)毒性;含鐵為20 mg/L時(shí),也對(duì)BOD5的檢測(cè)過程呈現(xiàn)毒性;含 鉛為1mg/L以上時(shí), 會(huì)推遲細(xì)菌繁殖,并使去除率下降；含鎘為2.5 mg/L時(shí),對(duì)BOD₅的檢測(cè)過程呈現(xiàn)毒性。 須藤［1］用Ilm(Median inhibitory limit，即能使比增殖速率降低50%的濃度)來評(píng)價(jià)金屬鹽對(duì)原生動(dòng)物增殖速率的影響(見表2)。小口鐘蟲和蓋蟲類是活性污泥中重要的生物，在出 水良好的情況下，兩者都為優(yōu)勢(shì)種類，如果其個(gè)體數(shù)下降，則說明處理水質(zhì)正在下降。?

表2　重金屬對(duì)原生動(dòng)物增殖速率的影響　　mg/L 原生動(dòng)物的種名 抑制極限 Cu Cr Cd Zn Fe Al 小口鐘蟲 0.25 0.53 0.49 0.90 0.47 3.4 彎豆形蟲 0.32 12.9 0.06 8.8 26 56 蓋蟲類 0.27 20.2 0.11 0.42 11 0.03

1.2　重金屬耐受菌
　　對(duì)較高濃度重金屬離子有耐受性的細(xì)菌，如假單胞桿菌屬、酵母菌和霉菌等，這些微生 物可將廢水中的重金屬離子攝入菌細(xì)胞內(nèi)再去除。
　　友枝等人從活性污泥中分離出對(duì)汞、鉻、銅有耐受性的微球菌屬和假單胞桿菌屬的細(xì)菌，在含汞為150 mg/L，鉻為700mg/L,銅為750mg/L的條件下可以生長(zhǎng)，重金屬被攝入后，在菌體內(nèi)可溶性與不溶性部分的Hg²⁺和Cd²⁺比例為2∶8。還使用這些菌類制作了強(qiáng)化活性污泥，對(duì)含鉻、銅離子的廢水所進(jìn)行的處理效果較好。
　　在霉菌、酵母菌中也有耐受性的細(xì)菌，村山等分離出對(duì)銅、鎳、鉻、鈷有耐受性的酵母菌株，這可能是微生物具有使重金屬離子向細(xì)胞內(nèi)滲透的調(diào)節(jié)機(jī)構(gòu)。Okamoto還分離出對(duì)銅有耐 受性的真菌［2］?。?

2　礦山酸性廢水的處理

2.1　氧化亞鐵硫桿菌
　　氧化亞鐵硫桿菌(Thiobacillus ferrooxidans?)是一種在酸性環(huán)境下生長(zhǎng)的化能自養(yǎng)型菌，以CO₂為碳源，通過氧化2價(jià)鐵或硫而增殖,在低pH值下生長(zhǎng),對(duì)重金屬的耐受性強(qiáng)。細(xì)菌大小為0.5μm×1.0μm，形狀呈短桿狀，末端呈半圓形，在400倍以上顯微鏡下可觀察到細(xì)菌數(shù)量。細(xì)胞成分：蛋白質(zhì)44%，類脂26%，碳水化合物15%，灰分10%。細(xì)胞結(jié)構(gòu)與其他革蘭氏陰性菌相似,細(xì)胞膜由三層適滲透壓層和三層抗適滲透壓層組成,總厚約12.5～21.5nm。?
　?、貴e²⁺的氧化機(jī)制?
　　鐵的氧化機(jī)制復(fù)雜,多數(shù)學(xué)者接受的觀點(diǎn)是:細(xì)胞色素系統(tǒng)中的O₂作最終電子受體,電子傳遞方向?yàn)镋h從低到高,由Fe²⁺氧化成Fe³⁺的過程中有ATP生成,全過程有O₂參與,使CO₂得到固定。上述氧化機(jī)制稱其為氧化磷酸化作用。?

　　　　4FeSO₄+2H2SO4+O₂2Fe2(SO₄)3+2H₂O
?　　　Eh=0.771+0.0591lg(Fe³⁺/Fe²⁺)?

　　②鐵砷共沉機(jī)制?
　　氧化亞鐵硫桿菌對(duì)Fe²⁺具有強(qiáng)烈的氧化作用,pH=1.3～4.5時(shí),Eh可達(dá)0.74V。酸性水中FeAsO₄氧化水解的氧化還原電位是0.691，由此可以看出,它能促成 其他離子如As³⁺的氧化,可形成砷酸鹽與鐵的氫氧化物共沉。其后可投加石灰,利用砷 酸鈣的難溶性,分別將氫氧化鐵和砷酸鹽去除。?
　　③對(duì)無機(jī)硫化物的氧化?
　　所有硫桿菌均系借助于將S或S2O₃^2-氧化成SO₄^2-而生長(zhǎng)，氧化亞鐵硫桿菌氧化Fe²⁺的世代周期為6.5～15h，氧化S的世代周期為10～25h(是氧化Fe²⁺的2倍)，故氧化S的速度遠(yuǎn)不及氧化Fe²⁺的速度。對(duì)硫化物的氧化途徑為：S^2-→S→S₂O₃^2-→S₄O₆^2-→SO₃^2-→SO₄^2-
2.2　處理流程與裝置
由日方所提供裝置的基本流程見圖1，菌種由當(dāng)?shù)氐V山現(xiàn)場(chǎng)采集并培養(yǎng)而成。?

2.3 處理效果
　　礦山廢水中的Fe²⁺通過鐵氧化菌氧化成Fe³⁺后，可用碳酸鈣進(jìn)行中和處理。應(yīng)該指出，F(xiàn)e²⁺即使在pH值達(dá)到8時(shí)也不能完全被去除，但在pH值為4時(shí)便可生成氫氧化鐵沉淀去除，這使中和劑用量和沉淀物量大大減少，降低了處理成本。?
　?、傺趸?
　　德興銅礦廢水：pH=3.0,進(jìn)水量為143～168mL/min,回流泥量為165～190mL/min,充氣量為7L/min,水力停留時(shí)間為1h；Fe²⁺進(jìn)水濃度為1364～1757mg/L,出水降到47.3～194mg/L,氧化率達(dá)86%～98%。武山銅礦廢水：pH=3.0,充氣量為0.30m³/(m²·min),氧化時(shí)間為0.5h,對(duì)Fe²⁺的氧化率達(dá)98%；槽中細(xì)菌數(shù)為10⁷～10⁸個(gè)/mL,回流污泥中細(xì)菌數(shù)為10⁷～10⁹個(gè)/mL,沉淀池上清液細(xì)菌數(shù)為10⁴～10⁵個(gè)/mL?？刂莆勰嗷亓髁浚３只亓鞯窖趸蹆?nèi)的污泥濃度是關(guān)鍵。
　?、谥泻统恋矶?
　　將pH值控制在6左右，以石灰進(jìn)行中和，生成Fe(OH)₃沉淀,上清液排放。城門山礦廢水中，細(xì)菌還將As³⁺氧化為As⁵⁺，使廢水中的鐵、砷共沉,As濃度由0.5mg/L降至0 .05mg/L。?
　?、酆筇幚矶?
　　城門山礦廢水中含Zn，需將pH值調(diào)至8.6，即加消石灰去除。出水中Zn濃度由23mg/L降至0.004mg/L,錳由5mg/L降至0.1mg/L,鉛由2.5mg/L降至0.2mg/L。?
2.4　影響因素分析
　　①環(huán)境因素?
　　最佳溫度是30～35℃；最佳pH值為2.5～3.8?。隨著反應(yīng)的進(jìn)行,pH值逐步下降,pH＜1時(shí) ,污泥活性會(huì)降低，可通過馴化來提高氧化活性；適宜的Eh=400～700mV,此時(shí)氧化還 原電位為正值,與需氧條件吻合。?　?、谕鈼l件?
　　CO₂是唯一的碳源，O₂是最終電子受體。氧化1molFe需消耗250mmolO₂,故保持通氣是重要的工況條件，充氣量大小是決定反應(yīng)速率的重要因素。?
　?、奂?xì)菌耐受性?
　　不同條件下細(xì)菌耐受性有變化,如武山銅礦的耐As為800mg/L、Pb為20mg/L,而對(duì)Hg²⁺、Ag²⁺的耐性較差,分別只有2mg/L和10mg/L。表面活性劑和有機(jī)溶劑的大量存在 導(dǎo)致細(xì)菌活性降低。
　?、茌d體?
　　為保證連續(xù)氧化,氧化槽內(nèi)需保持一定的污泥濃度,需要載體作為細(xì)菌的絮體晶核。?
　　初始pH＜2.0時(shí),中和處理產(chǎn)生的鐵沉淀物易溶解，不能作為穩(wěn)定的載體,只能以石膏或硅藻土作為載體，但硅藻土硬度大，會(huì)使配管和閥門耗損；初始pH＞2.5時(shí),以CaCO₃中和處 理產(chǎn)生的鐵沉淀物作為載體,增殖后的細(xì)菌吸附在鐵沉淀物上。工藝上通過添加絮凝劑、沉降分離來回流載體，利于氧化槽內(nèi)連續(xù)處理的穩(wěn)定性。?

3　硫酸還原菌法去除重金屬

3.1 硫酸還原菌
　　硫酸還原菌(Sulfate Reduction Bacteria,SRB)為一種進(jìn)行硫酸鹽還原代謝的厭氧菌類 ,呈革蘭氏陰性，以有機(jī)物為供電子體,硫酸鹽為電子受體，根據(jù)不同的有機(jī)物利用性能，分為8個(gè)屬：Desulfouibrio短螺旋狀，Desulfotomaculum孢子環(huán)狀，Desulfomon as環(huán)狀，Desulfobacter短環(huán)狀，Desulfococcus球狀，Desulfonema絲狀。細(xì)菌大小為0.5μm×1.0 μm，生長(zhǎng)pH值為4.5～9.5，最佳pH值為6.5～8.0，最佳溫度 為15～45℃。
3.2　SRB去除重金屬原理
　　厭氧生物法處理酸性礦山廢水的基本原理是將含重金屬及硫酸根離子的廢水在pH值為中性、在一定的基質(zhì)濃度和厭氧環(huán)境下,用硫酸還原菌,使硫酸根離子還原成硫離子,使廢水 中的Cu、Cd、Fe、Zn等重金屬離子變成不可溶的金屬硫化物而沉淀。產(chǎn)生的不可溶的金屬硫 化物比傳統(tǒng)的中和法形成的沉淀物穩(wěn)定性好，體積只是其1/4。?
　　2CH₃CH(OH)COO^-+SO₄^2-→2CH₃COO^-+S^2-+2CO₂+2H₂O(以乳酸為基質(zhì))

　　　　4HCOO^-+SO₄^2-4HCO₃^-+S^2-(以甲酸根為基質(zhì))
　　　　S^2-+M²⁺→MS↓?
3.3　反應(yīng)器類型
　　根據(jù)載體類型和清洗難易程度確定反應(yīng)器類型。固定填充床載體用CaCO₃或聚乙烯塑料等，Maree等［4］對(duì)金礦排水利用糖蜜去除SO₄^2-，加量為2～3mL/L原水；上流式厭氧填充床用白云石為載體，進(jìn)水量為0.8～1.8L/d,回流量為20L/d，回流目的：①避免填充床堵塞；②緩沖pH梯度，SO₄^2-還原過程中產(chǎn)生大量堿度可中和進(jìn)水酸度，結(jié)果SO₄^2-濃度由2480mg/L降至180mg/L，pH值由6升至7.2,堿度由40mg/L升至2315 mg/L；③定期提高流速至0.9m/min,以清洗產(chǎn)生的重金屬沉淀物和剩余污泥。流動(dòng)床載體有鋸末、鐵屑、硅藻土等，流動(dòng)床的處理效率較高，可避免堵塞。Wakao等5］使用鋸末為載體,在厭氧條件下對(duì)硫酸還原菌(Desulfouibrio)進(jìn)行培養(yǎng)。S.Kalyuzhnyi等6］采用UASB反應(yīng)器處理，硫酸還原率達(dá)80%。?
3.4　運(yùn)行條件和方法
　?、賞H值?
　　最佳pH值為6.5～8.0，pH值在4.5以上細(xì)菌即可保持活性，重金屬沉淀效果良好；pH值更低 時(shí)應(yīng)加大回流比或直接加堿調(diào)整pH值。?
　?、赩FA最佳投量?
　　既要保證SRB還原SO₄^2-時(shí)有充足的碳源(大于按生化反應(yīng)計(jì)算的理論值)，又要盡量減小還原后殘留的?COD。理論COD/SO₄^2-值為0.67∶1。
　?、劬N培養(yǎng)?
　　a.純菌培養(yǎng)體系：日本岡山大學(xué)今井研究室從礦山坑道底泥中培養(yǎng)出Desulfouibrio Vulg aris菌。
　　b.從消化污泥中培養(yǎng)SRB菌種：以甲酸根或蔗糖為基質(zhì)，用氯仿抑制甲烷菌，菌種培養(yǎng)啟動(dòng)時(shí)間比純菌培養(yǎng)的大大縮短，并形成顆?；?。?
　?、芴荚?
　　酸性礦山廢水中有機(jī)物含量通常很低，所以利用SRB還原SO₄^2-的關(guān)鍵是選擇技術(shù)可行、經(jīng)濟(jì)合理的碳源。?
　　a.利用乙酸、丙酸、丁酸和一些長(zhǎng)鏈脂肪酸及糖蜜、玉米精(CSL)。Maree等利用糖蜜為碳源去除SO₄^2-。1994年日本在柵原礦山的寶殿坑口廢水處理中，用乳酸鈉和CSL為碳源。
　　b.以厭氧消化揮發(fā)有機(jī)酸作碳源。李亞新等^［7］利用生活垃圾中溫發(fā)酵產(chǎn)物作碳源, 發(fā)酵產(chǎn)物中揮發(fā)脂肪酸濃度高，乙酸在總揮發(fā)酸中占39.9%～97.4%。?
3.5　二次處理?
　?、佼a(chǎn)生的沉淀物的回收是實(shí)用化的關(guān)鍵。通常采用強(qiáng)水流反沖洗將載體上附著物剝離后，通過混凝沉淀的方法加以富集，混凝劑添加量為10mg/L,SVI=22%，污泥濃縮后脫水。
　?、诹蛩徇€原后出水中過高的COD、硫化氫必須進(jìn)行二次處理，以防止二次污染。可利用自養(yǎng)型光合成菌的紅硫細(xì)菌(Chromatium)將剩余硫化氫氧化成單質(zhì)硫，當(dāng)然需控制反應(yīng)條件，否則會(huì)進(jìn)一步氧化成硫酸。?

4　其他處理法

4.1　利用假單胞桿菌去除汞、鉻
　　對(duì)有機(jī)或無機(jī)汞離子，使用特定的微生物酶進(jìn)行還原代謝,汞還原酶與細(xì)胞質(zhì)體有依存關(guān)系，使汞離子變成金屬汞而沉淀或氣化。外村等分離出假單胞桿菌屬K62菌株^［2］分解甲基汞或苯汞,并氧化成金屬汞回收。
　　S.silver、Marques等［8］對(duì)Cr⁶⁺離子用假單胞桿菌屬進(jìn)行還原代謝。
4.2　生物塘凈化法
　　生物塘是一個(gè)復(fù)合的水生生態(tài)系統(tǒng)，內(nèi)有細(xì)菌、藻類、原生動(dòng)物、水生植物如鳳眼蓮(Eic hornia Crassies)或魚類，在污染物的凈化中起著不同的作用，協(xié)同完成對(duì)污染物的吸收積累、分解和凈化作用。張志杰等［9］的研究結(jié)果表明，干重1kg的鳳眼蓮在7～10d可吸收鉛3.797g、鎘3.225g。?
4.3　利用SR菌處理Cr6+
　　中科院成都生物研究所篩選出對(duì)Cr6+具有適應(yīng)性的SR復(fù)合菌處理電鍍廢水^［8］，研制出固定化生物反應(yīng)器，將Cr⁶⁺轉(zhuǎn)化為Cr³⁺后，通過反應(yīng)混合沉淀將Cr、Zn等離子去除，金屬可回收。

5　結(jié)論

　?、僦亟饘倥c生物化學(xué)反應(yīng)密切相關(guān)，含重金屬離子廢水的生物處理法作為一項(xiàng)新的實(shí)用技術(shù)極具潛力。
　?、诓捎肨.Ferrooxidans菌，在好氧條件下亞鐵迅速被氧化成三價(jià)鐵，在pH值低時(shí)便生成氫氧化鐵沉淀，與傳統(tǒng)的石灰中和相比,中和劑用量和沉淀物量大大減少，降低了處理成本。
　?、鄄捎肧RB菌，在厭氧和中性pH值條件下硫酸根離子還原成S^2-，產(chǎn)生不溶的金屬硫 化物沉淀，比傳統(tǒng)的中和法縮小體積3/4。?
　?、苤亟饘匐x子廢水生物處理實(shí)用化的關(guān)鍵是高效菌的篩選、固定化、最大生物量及活性的 保持和二次處理問題。

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