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用于環(huán)境污染物遺傳毒性評價的重組發(fā)光細(xì)菌載體的構(gòu)建

論文類型 基礎(chǔ)研究 發(fā)表日期 2008-11-01
來源 環(huán)境科學(xué)
作者 黃新新,何苗,施漢昌,蔡強(qiáng)
關(guān)鍵詞 重組發(fā)光菌;遺傳毒性;PUCD2 uvrA 、PUCD2alkA 載體
摘要 基因重組發(fā)光菌在水質(zhì)毒性的評價中具有重要的作用,本研究從污染物遺傳毒性損傷的機(jī)制出發(fā),構(gòu)建2 種遺傳毒性新型基因重組發(fā)光菌載體PUCD2 uvrA 、PUCD2alkA. 用PCR 法從大腸桿菌W3110 中擴(kuò)增uvrA 、alkA 基因,將其與pGEM2T easy 載體連接后測序. 測序正確的uvrA 、alkA 片段及PUCD615 載體均用BamH Ⅰ、EcoR Ⅰ雙酶切,連接后電轉(zhuǎn)化導(dǎo)入宿主菌JM109. 挑取克隆,提取質(zhì)粒用PCR 鑒定,陽性克隆再進(jìn)行測序. 結(jié)果表明, uvrA 、alkA

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