逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)技術同時檢測水中多種腸道病毒
論文類型 | 基礎研究 | 發表日期 | 2007-02-01 |
來源 | 環境科學研究 | ||
作者 | 張崇淼,劉永軍,王曉昌,薛小平 | ||
關鍵詞 | 腸道病毒 逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR) 通用引物 同時檢測 水 | ||
摘要 | 建立了一種利用通用引物RT- PCR 技術檢測水中腸道病毒的方法.利用脊髓灰質炎病毒1~3 型,柯薩奇病毒B3型作為參考病毒株,根據腸道病毒RNA5′非編碼區中具有高度同源性的序列來設計通用引物. 比較了M- MLV 酶和AMV 酶的逆轉錄效果,AMV 酶能夠成功地從地表水和生活污水中逆轉錄病毒RNA ,更適于實際應用. 對比研究了PCR 過程中的退火溫度,c (Mg2 + ) 等因素對RT- PCR 檢測結果的影響,選擇退火溫度55 ℃, c (Mg2 + ) 為2mmolPL的反應條件,優化了RT - |
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